在養(yǎng)豬生產(chǎn)中，常在仔豬教槽料和前期保育料中同時(shí)添加多種抗生素來預(yù)防斷奶應(yīng)激引起的腹瀉，促進(jìn)仔豬生長。然而，長期使用甚至濫用抗生素會(huì)使細(xì)菌產(chǎn)生抗藥性，降低動(dòng)物機(jī)體免疫力，造成畜產(chǎn)品和環(huán)境中抗生素和鋅的殘留[1]。因此，尋找高效、無殘留的綠色飼料添加劑替代抗生素成為近年來的研究熱點(diǎn)?，F(xiàn)有研究表明，益生菌具有改善腸道微生態(tài)環(huán)境、促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化和代謝、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、提高動(dòng)物生長性能等功能[2]，作為微生態(tài)飼料添加劑在畜禽養(yǎng)殖中已被廣泛應(yīng)用。常見的益生菌主要有枯草芽孢桿菌、乳酸菌、雙歧桿菌、類鏈球菌和酵母菌等幾大類，其中枯草芽孢桿菌能夠形成芽孢，具有抗逆性強(qiáng)、耐高溫高壓、耐酸堿、便于生產(chǎn)和儲(chǔ)存等特點(diǎn)，是目前應(yīng)用最廣泛的益生菌之一[3-4]。研究表明，在母豬或仔豬飼糧中添加枯草芽孢桿菌可增加腸道有益菌數(shù)量，減少致病菌數(shù)量[5]，降低仔豬腹瀉率，提高窩產(chǎn)活仔數(shù)、仔豬初生重和斷奶重[6]，增加血清免疫球蛋白含量[7-8]。Rashid等[9]研究認(rèn)為，枯草芽孢桿菌還能夠增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化性能。因此，本研究評(píng)價(jià)了飼糧添加枯草芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬生長性能和腹瀉率的影響，通過測(cè)定血漿生化參數(shù)探討其代謝調(diào)節(jié)機(jī)制，為其在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的推廣應(yīng)用提供重要依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物、分組與飼養(yǎng)管理

動(dòng)物試驗(yàn)在中國科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所永安動(dòng)物試驗(yàn)基地開展。試驗(yàn)選用25日齡斷奶的“長×大”二元雜交仔豬120頭，均為去勢(shì)公豬。根據(jù)體重隨機(jī)分為3個(gè)組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8頭豬?？瞻讓?duì)照組飼喂不添加抗生素的基礎(chǔ)飼糧，抗生素組在基礎(chǔ)飼糧中添加40 mg/kg的維吉尼亞霉素制劑(有效含量為20 mg/kg)，枯草芽孢桿菌組在基礎(chǔ)飼糧中添加250 g/t的枯草芽孢桿菌制劑(活菌數(shù)量≥4.0×109 CFU/g)。試驗(yàn)使用的枯草芽孢桿菌制劑由贏創(chuàng)德固賽(中國)投資有限公司提供，其添加劑量根據(jù)前人相關(guān)研究報(bào)道[10]及生產(chǎn)廠家建議確定。斷奶后前3天飼喂相同的商品乳豬保育料；試驗(yàn)從28日齡[仔豬平均體重(7.00±0.45) kg]開始，28~48日齡飼喂保育前期料、49~69日齡飼喂保育后期料，試驗(yàn)期42 d。飼喂、飲水和免疫等飼養(yǎng)管理按商業(yè)養(yǎng)殖場(chǎng)規(guī)范操作?；A(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表 1。

1.2 生長性能和腹瀉率測(cè)定

分別于試驗(yàn)第1、7、21和42天，記錄每欄仔豬的體重及日采食量，計(jì)算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)；試驗(yàn)期間，每天記錄每欄仔豬的腹瀉情況，并計(jì)算腹瀉率。

腹瀉率(%)=(腹瀉豬頭數(shù)×腹瀉天數(shù))/(總試驗(yàn)豬頭數(shù)×試驗(yàn)天數(shù))×100。

1.3 血液樣品采集與生化參數(shù)分析

分別于試驗(yàn)第7、21和42天，每欄選擇1頭接近平均體重的仔豬，前腔靜脈采血8 mL，肝素抗凝，4 ℃離心10 min(3 000 r/min)分離血漿，-20 ℃保存。用全自動(dòng)生化分析儀(羅氏Cobas® c311)測(cè)定血漿中葡萄糖(GLU)、總蛋白(TP)含量及α-淀粉酶(α-AMY)、乳酸脫氫酶(LDH)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性。測(cè)定方法按照羅氏公司提供的試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

以欄為單位，試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2016初步整理后，利用SPSS 18.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，P < 0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 枯草芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響

由表 2可見，試驗(yàn)第7、21和42天，枯草芽孢桿菌組的體重均顯著高于空白對(duì)照組(P < 0.05);試驗(yàn)第1~7天、第8~21天、第22~42天和第1~42天，枯草芽孢桿菌組的ADFI均為最高；試驗(yàn)第1~42天，枯草芽孢桿菌組的ADG最高，且顯著高于空白對(duì)照組(P < 0.05)。

 

 

2.2 枯草芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬腹瀉率的影響

由表 3可見，與空白對(duì)照組相比，枯草芽孢桿菌組和抗生素組試驗(yàn)第1~7天腹瀉率差異不顯著(P>0.05)，試驗(yàn)第8~21天、第22~42天和第1~42天腹瀉率均顯著降低(P < 0.05)。與抗生素組相比，試驗(yàn)第22~42天枯草芽孢桿菌組腹瀉率顯著降低(P < 0.05)。

2.3 枯草芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬血漿生化參數(shù)的影響

由表 4可見，與抗生素組相比，枯草芽孢桿菌組試驗(yàn)第42天的血漿LDH和AST活性均顯著升高(P < 0.05)，試驗(yàn)第21天枯草芽孢桿菌組和空白對(duì)照組的血漿GLU含量顯著降低(P < 0.05)；各時(shí)間點(diǎn)各組間的血漿α-AMY和ALT活性以及TP含量均無顯著差異(P>0.05)。

 

3 討論

在養(yǎng)豬生產(chǎn)中，通常在仔豬飼糧中添加大劑量的抗生素來減少斷奶應(yīng)激引起的仔豬腹瀉。本研究結(jié)果表明，飼糧添加枯草芽孢桿菌可在一定程度上提高斷奶仔豬的ADFI和ADG, 降低F/G，顯著降低斷奶仔豬的腹瀉率，其效果與抗生素組相當(dāng)。黃雪泉[11]研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌制劑能提高哺乳仔豬ADG，降低F/G；萬根等[12]研究表明，枯草芽孢桿菌可顯著提高仔豬的生長性能，降低腹瀉率。其作用機(jī)制可能是枯草芽孢桿菌抑制腸道有害菌的生長, 刺激有益微生物的生長[13]，或保護(hù)腸上皮細(xì)胞屏障免受毒素的破壞[14]，這與本研究結(jié)果一致。

血漿生化參數(shù)可反映動(dòng)物體內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)代謝情況。血漿GLU含量受胰島素和胰高血糖素等激素的調(diào)節(jié)，與動(dòng)物采食量、機(jī)體營養(yǎng)狀況和應(yīng)激水平呈正相關(guān)[15]。在本研究中，與抗生素組相比，試驗(yàn)第21天，飼糧添加枯草芽孢桿菌降低了血漿GLU含量，這可解釋斷奶仔豬采食量增加的原因，其主要原因可能是由于枯草芽孢桿菌減少了仔豬的斷奶應(yīng)激。血漿α-AMY活性是反映機(jī)體淀粉消化吸收狀況的一個(gè)重要指標(biāo)，提高血漿α-AMY活性可增強(qiáng)機(jī)體的消化吸收能力和抗病力[16]。在本研究中，與抗生素組相比，飼糧添加枯草芽孢桿菌在一定程度上提高了血漿α-AMY活性，提示斷奶仔豬的消化吸收能力和機(jī)體抗病力不斷增強(qiáng)。在斷奶過程中，仔豬的采食量降低、腸道或肌肉能量供給不足、細(xì)胞萎縮或凋亡，均可引起血漿中LDH活性的上升[16]。在本研究中，飼糧添加枯草芽孢桿菌7 d后血漿LDH活性較低，提示斷奶應(yīng)激引起的細(xì)胞損傷得到緩解；試驗(yàn)21或42 d后血漿LDH活性升高，這是否與后期仔豬采食量增加、機(jī)體代謝加快導(dǎo)致細(xì)胞凋亡加速有關(guān)，尚需要進(jìn)一步深入研究。

血漿TP含量可在一定程度上反映機(jī)體蛋白質(zhì)的吸收和代謝狀況。在本研究中，與抗生素組相比，飼糧添加枯草芽孢桿菌可在一定程度上提高血漿TP含量，提示動(dòng)物機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的消化吸收能力和蛋白質(zhì)合成能力增強(qiáng)，這有利于動(dòng)物的生長發(fā)育[17]。AST和ALT是反映肝臟和心臟功能的重要指標(biāo)，也是動(dòng)物體內(nèi)重要的轉(zhuǎn)氨酶，影響多種氨基酸的代謝[18]。在本研究中，與抗生素組相比，飼糧添加枯草芽孢桿菌顯著提高了試驗(yàn)第42天血漿AST活性，提示斷奶仔豬對(duì)氨基酸或小肽的利用率增加，從而有利于仔豬的生長。

4 結(jié)論

與抗生素組相比，飼糧添加枯草芽孢桿菌可顯著提高仔豬血漿AST活性，降低腹瀉，可促進(jìn)仔豬生長。

參考文獻(xiàn)：略

作者：王曉丹, 孔祥峰, 趙越, 章文明, 王占彬

摘自：動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)

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